本发明一种L‑丝氨酸的制备方法，其特征在于包含有以下步骤：a.细胞破碎工艺段；b.分离细胞碎片并对分离液浓缩工艺段；c.酶促转化工艺段；d.柱分离工艺段；e.结晶工艺段。改进后工艺改降低了后续L‑丝氨酸分离的难度和分离周期。可节约时间24h左右，而且减少了由于分离细胞碎片导致的氨基酸的损失，产量从每批次的50公斤变为60公斤，大约增加10kg，同时利用废旧的树脂节约了膜分离的膜成本，每年膜使用成本从30多万元降低至15万左右。