本发明公开了一种低温诱导的胶原自组装凝胶及其制备方法。该制备方法包括：1)在4℃‑20℃低温条件下，以酸性溶液溶解天然胶原，得到胶原溶液；2)以磷酸盐缓冲溶液对步骤1)所得胶原溶液进行透析；3)在4℃‑20℃低温条件下，对步骤2)所得胶原溶液进行紫外辐射，得到所述胶原自组装凝胶。本发明利用紫外辐射在低温条件下诱导胶原分子纤维化自组装，有效降低了胶原分子自组装的温度阈值，拓宽了胶原纤维化自组装特征分子行为的应用范围。本发明制备的胶原自组装凝胶，具有良好的热稳定、凝胶强度和细胞相容性，有效提升了胶原自组装凝胶的生物学性能和应用价值。