本发明属于粮油精深加工领域，具体涉及一种黄曲霉毒素脱毒剂制备方法和应用。制备方法包括：获得蒙脱土悬浊液；获得蒙脱土的酸性悬浊液；加入组氨酸，混合、离心，收集第二沉淀物；水洗至不含氯离子，收集水洗沉淀物；冷冻干燥，制得黄曲霉毒素脱毒剂。本发明的黄曲霉脱毒剂以无毒、可再生的组氨酸为改性剂和加工助剂蒙脱土原料，在酸性环境下改性蒙脱土，结合冷冻干燥处理制得脱毒剂，工艺简单，产品安全且脱毒效果好。该脱毒剂脱除黄曲霉毒素效果优于原料蒙脱土脱毒效果，黄曲霉毒素脱除率比原料蒙脱土至少提高13％，适合大部分食用油脱除黄曲霉毒素。